病毒包装

病毒包装目的在于将目的基因包装进病毒颗粒，生产具有感染性但没有致病性的工程化病毒。

病毒包装技术在应用上具有以下的特点：

• 病毒包装技术经历了多年的研究，已趋于成熟，可用于产业化大量生产
• 病毒基因组的结构简单、分子背景比较清楚，稳定易于改造、易于制备
• 病毒的宿主范围广，且具有高效的靶向特异性
• 在目的基因表达方面相对于脂质体介导的基因递送效果更明显、长久、稳定
• 工程化病毒一般是复制缺陷型的，安全性高

病毒包装的过程（以慢病毒进行RNAi为例）

1. 根据目的基因相关信息，构建打靶目的基因序列shRNA的慢病毒载体；

2. 扩增并制备纯化的shRNA慢病毒载体；

3. 将shRNA慢病毒载体和病毒包装质粒共转染包装细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液；

4. 浓缩、纯化病毒液；

5. p24 ELISA法测定慢病毒滴度；

6. 用高质量的病毒液感染宿主细胞；检测基因功能或者siRNA的沉默效率以及使用抗生素进行稳转细胞株的筛选。通常状况下，筛选的细胞株具有长期的表达稳定性。病毒液足够用于一般的动物活体实验。

资料来源：