云舟生物的过表达稳转细胞株可帮您克服基因瞬时转染效率的不稳定性。我们的基因过表达细胞采用慢病毒转导以及抗性筛选方法制备。目的基因表达水平采用RT-qPCR方法验证。此外,我们还会对每批细胞株产品进行一系列QC检验,如无菌检测、支原体检测等。根据您的需求,我们还可提供其它检测方项目,如WB、免疫组化试验等。
亮点:
- 转基因永久整合:慢病毒转导的转基因整合宿主细胞基因组,细胞传代多次后仍具有稳定的表达效果。
- 可转导多种靶细胞:基因转导采用的慢病毒的包膜蛋白为VSV-G,具备感染多种类型的哺乳动物细胞的能力。
- 周期短:载体设计完成后的细胞从改造到交付,快至9周。
服务详情
订购信息
服务 | 交付内容 | 价格(CNY) | 周期 |
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基因过表达细胞稳转株构建 | 多克隆细胞群(>106个细胞/管, 2管) | ¥13,980起 | 8-11周 |
两个单克隆细胞株(>106个细胞/管, 每个克隆各2管) | ¥18,980起 | 13-16周 |
* 增加交付克隆数将收取额外费用。
QC试验
试验项目 | 方法 |
基因过表达验证(默认) | RT-qPCR |
表达测试(额外收费) | WB、IF、FACS |
无菌测试(默认) | 支原体检测、生物负荷检测等 |
下游服务
对于您的细胞稳转株,我们可以开展多种类型的表型分析和功能验证,保括细胞增殖、凋亡、迁移、细胞活力、细胞毒性等。
案例分析
图2 基因过表达细胞稳转株的表达验证。(A)在ID8、CHO-K1、HEK293细胞中分别过表达慢病毒转导的MSLN、B7-H3、以及CD19,流式细胞术分析。(B)WB分析Caco-2细胞的蛋白表达水平。(C)荧光素酶试验检测MCF7细胞中过表达的荧光素酶报告基因。(D)表达荧光素酶报告基因的Renca细胞源性异种移植小鼠模型,体内成像追踪肿瘤迁移。
常见问题解答
| 方法 | 优势 | 不足 |
基因过表达 | 慢病毒 | 技术简单 | 随机插入 |
基因敲入 | CRISPR(RNP电转) | 靶向整合 | 需要转导多种组分 |
| 优势 | 不足 |
慢病毒转导 | 转基因整合宿主细胞基因组、转基因永久表达、较容易转导靶细胞转导 | 低装载量(最高6.7 kb) |
质粒转染 | 装载量上限高(可达27 kb) | 瞬时表达、传代后质粒浓度降低、需要电转或其它转染方式 |
相关服务
载体构建 慢病毒包装