MSCV逆转录病毒

MSCV（Murine stem cell virus）逆转录病毒载体是⼀种有效的转基因⼯具，能在胚胎⼲细胞、胚胎癌细胞、造⾎⼲细胞和其他⼏种哺乳动物细胞系中稳定表达外源基因。MSCV逆转录病毒载体的5’ LTR经过精⼼设计，采⽤来⾃于⿏⼲细胞PCMV病毒的序列，能激活外源基因在多能⼲细胞中的表达，从⽽克服了MMLV逆转录病毒在⼲细胞中基因沉默的问题。我们开发出⼀系列专有技术和试剂，从病毒滴度、纯度、活性以及⼀致性等⽅⾯显著提升了MSCV逆转录病毒包装⼯艺⽔平。

订购信息

生产规格	总量	最小滴度	分装	价格（CNY）	周期
MSCV逆转录病毒⼩量制备	>2.5x10⁶ TU	>10⁷ TU/ml	10x25 ul	￥3,180.00	6-12天
MSCV逆转录病毒中量制备	>10⁷ TU	>10⁷ TU/ml	10x100 ul	￥4,680.00
MSCV逆转录病毒大量制备	>10⁸ TU	>10⁸ TU/ml	10x100 ul	￥7,780.00
超纯化MSCV逆转录病毒⼤量制备	>10⁸ TU	>10⁸ TU/ml	10x100 ul	￥11,880.00

服务详情

病毒类型

我们提供以VSV-G假病毒化的MSCV逆转录病毒包装服务。

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交付内容

	非纯化MSCV逆转录病毒制备服务	纯化MSCV逆转录病毒制备服务
交付内容	定制病毒，按照规格交付：⼩量制备：>10⁷TU/ml，10x25 ul 中量制备：>10⁷TU/ml，10x100 ul ⼤量制备：>10⁸TU/ml，10x100 ul	定制病毒，按照规格交付：⼤量制备：>10⁸TU/ml，10x100 ul
	对照病毒，按照定制病毒的规格对应赠送：⼩量制备：>10⁷TU/ml，100 ul 中量制备：>10⁷TU/ml，2x100 ul ⼤量制备：>10⁷TU/ml，2x100 ul	对照病毒，按照定制病毒的规格对应选购：⼤量制备：>10⁸TU/ml，10x100 ul
	Polybrene（5 mg/ml，200 ul），赠送	Polybrene（5 mg/ml，200 ul），赠送
病毒重悬液	HBSS缓冲液	HBSS缓冲液
运输/存储	干冰/-80°C，避免反复冻融	干冰/-80°C，避免反复冻融
推荐应用	体外培养细胞转导	体外培养细胞转导、动物体内细胞转导

对照病毒

为了更好地开展您的实验，我们按照“对照病毒与定制病毒的生物学应用相匹配”的原则给您赠送或者推荐对照病毒。例如，如果定制病毒表达一个基因，则推荐的对照病毒表达荧光蛋白EGFP。推荐的对照病毒信息如下表所示：

对照病毒	对照载体名称	对照载体ID	定制病毒
EGFP对照MSCV逆转录病毒， Puro抗性	pMSCV[Exp]-EGFP/Puro	VB010000-9311qyq	哺乳动物基因表达MSCV逆转录病毒、哺乳动物非编码RNA表达MSCV逆转录病毒

运输/储存

我们的MSCV逆转录病毒存储在HBSS缓冲液中，并采用干冰运输。收到病毒后，立即放置于-80℃，长期贮存至少6个月。MSCV逆转录病毒的保质期约为一年。请避免反复冻融，因为这会导致病毒滴度大幅下降。

生产/质控

步骤	描述	时间
Co-transfection	我们常规使用的MSCV逆转录病毒包装系统包括1个转移质粒（Transfer plasmid）、1个膜蛋白表达质粒（Envelope plasmid）、1个包装质粒（Packaging plasmid），将这些质粒共转染包装细胞。包装质粒分别为Gag/Pol表达质粒。	第1天
Supernatant collection	在细胞里，转移质粒转录出携带目的基因（Gene of Interest，简称GOI）的MSCV RNA基因组，与包装质粒表达出的衣壳结构蛋白、酶、调控蛋白组装成病毒颗粒后，转运到细胞膜内侧，形成包膜病毒分泌到胞外。膜蛋白质粒表达的VSV-G膜蛋白锚定在细胞膜上，随着病毒成熟，与细胞膜一起成为了病毒的膜。细胞短暂孵育后，收集上清，离心去除细胞碎片并过滤。	第3天
Concentration and purification	PEG浓缩病毒颗粒。对于超纯化MSCV逆转录病毒（体内应用级别），采用蔗糖离心方法进一步纯化、浓缩病毒。	第4天
Quality Control	对病毒进行滴度测定（Titer determination）、微生物检测（Bioburden test，针对细菌、真菌）、支原体检测（Mycoplasma test）等。若转移载体同时编码一个荧光蛋白，我们还会将病毒进行细胞转导以测定相应的荧光表达情况（Transduction test）。此外，对于超纯化MMLV逆转录病毒，我们还可以检测内毒素水平（Endotoxin test）。	第5天及以后

滴度保证

我们的滴度保证仅适用于包装进病毒的区域（从5’ LTR的R元件的第一个碱基到3’ LTR的R元件的最后一个碱基）小于MSCV逆转录病毒承载限度（8 kb）的载体。超过该范围，载体也许会被包装进病毒，但会造成病毒滴度降低。此外，对于如下载体，我们同样不能保证滴度：

包含对包装过程有不利影响的序列，例如毒性基因（如促凋亡基因）；破坏包装细胞或病毒的完整性（如导致细胞聚集的膜蛋白、含有polyA信号序列）的基因；易于重排或者产生二级结构的序列（如重复序列或者高GC含量序列）。
用户提供的载体，因为我们无法控制载体质量。

交付周期

交付周期是指订单接收到发货之间的时间，不包括需要客户提供任何物料（如病毒载体）的等待时间。

客户提供载体

如需客户提供MSCV病毒载体，则请按照外来物品接收指南将载体寄送给我们。请严格按照我们的指南来进行装运以免造成物品的任何延误和损坏。客户提供的所有材料均需经过QC检测，每一份材料附加检测费用。请注意，客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始。

视频

暂无

文档

暂无

COA

常见问题解答

MSCV逆转录病毒对比其他病毒载体有什么特点？▼

	慢病毒	MSCV	腺病毒	AAV
组织嗜性	广泛	广泛，常用于感染ES、EC 和HS 细胞	hAd5只感染表达CAR受体的细胞	取决于血清型
是否可感染非分裂细胞	是	否	是	是
病毒基因组稳定整合抑或游离于宿主基因组	稳定整合	稳定整合	游离的DNA附加体形式	游离的DNA附加体形式
自定义启动子	是	否	是	是
应用	细胞培养和体内实验	细胞培养和体内实验	体内实验	体内实验
体内免疫反应	低	低	高	非常低