云舟生物的Anti-hCD19-h28z CAR IVT mRNA编码一种嵌合抗原受体(CAR)蛋白,该蛋白的包含靶向人源CD19的scFv、一个CD8跨膜结构域,以及一个与CD3ζ融合的共刺激结构域(CD28或4-1BB)。与其它CAR相比,这种anti-hCD19-hBBz的设计已被证明可以在高效诱导免疫激活的同时具有更少的细胞因子释放、以及更高的抗凋亡蛋白表达水平。该mRNA产品采用Cap1加帽,含有经过验证的5’和3’UTR,以及一个110nt polyA尾巴。
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试验验证
- Anti-hCD19-h28z CAR IVT mRNA
- Anti-hCD19-hBBz CAR IVT mRNA

图1 Anti-hCD19-h28z CAR IVT mRNA在HEK293T中的表达。(A)Anti-hCD19-h28z CAR IVT mRNA的设计。(B)使用抗CD3ζ的抗体通过Western blot检测转染24小时后HEK293T细胞中CAR的表达。非特异性条带用 * 表示。

图2 IVT嵌合抗原受体(CAR)mRNA在293T细胞中的表达验证。(A)使用m1Ψ修饰的与无修饰的CD19 CAR mRNA转染293T细胞,这些mRNA均具有完整性良好的5’/3’UTR以及poly(A)。(B)转染后24 h,将细胞与PE标记的人源CD19共孵育,FACS检测CAR表达。(C)使用anti-CD3 zeta抗体和WB进一步检测CAR表达。