云舟生物的HiExpressTM萤火虫荧光素酶LNP-mRNA具有核苷修饰或无修饰的版本,且经过验证在体外和体内均有很高的表达水平。此外,我们也提供可靶向肝细胞ASGPR受体的GalNAc修饰的LNP,为LNP摄取提供了一种不同于传统ApoE/LDLR结合方式的选择。该产品通过密码子优化,可实现高效的基因表达,且无论是在标准的还是Ldlr-/-小鼠中都能有效递送。
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运输和储存
我们的LNP-mRNA产品存储于Tris缓冲液(pH 7.4),可以在-80°C下保存6个月。我们以干冰形式运输LNP-mRNA,请避免反复冻融。
试验验证
- HiExpress™萤火虫荧光素酶LNP-mRNA
- HiExpress™萤火虫荧光素酶GalNAc LNP-mRNA

图1 HiExpressTM萤火虫荧光素酶IVT mRNA的体外与体内表达效果。(A)HEK293T细胞中表达HiExpressTM萤火虫荧光素酶IVT mRNA以及其它版本的荧光素酶mRNA。细胞生长于12孔板,每孔转染0.5 ug mRNA。转染后6 h、24 h、48 h以及72 h测定荧光素酶活性。(B)向C57BL/6成年小鼠肌肉注射30 ug LNP包封的荧光素酶mRNA,注射后6 h、24 h、48 h测定荧光素酶活性。Fluc WT表示野生型荧光素酶mRNA。Fluc WT (co)表示经过密码子优化的荧光素酶mRNA。Fluc2表示luc2荧光素酶mRNA。HiExpressTM Fluc表示云舟生物HiExpressTM萤火虫荧光素酶IVT mRNA。

图2 使用GalNac-脂质纳米颗粒(LNP)在Ldlr-/-小鼠肝脏中实现mRNA的高效递送。m1Psi修饰的HiExpressTM Firefly Luciferase IVT mRNA被封装在GalNac或标准SM102 LNP中。向每只野生型或Ldlr敲除的C57BL/6小鼠尾静脉注射每公斤体重0.5 mg的封装的RNA。注射后6小时和24小时通过实时成像观察荧光素酶活性。